NCI-H23人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FLASH： 半胱酸蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體 615小鼠狀肺腺癌瘤株;P615 小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

LIF Others Human 人 LIF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

FOXF1： 叉頭蛋白F1抗體 人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL-I

NCI-H205細(xì)胞，人腎上腺腺瘤細(xì)胞 牛腎細(xì)胞,MDBK (NBL-1)細(xì)胞 CL-0357HHCC(人肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

FIP1L1： 高嗜酸性粒細(xì)胞綜合癥相關(guān)蛋白FIP1L1抗體 SFTPD Others Human 人 SFTPD / SP-D 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA 試劑盒 BMPR- II (Mouse Bone morphogenetic protein receptor II )  小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ 96T

MSH2： 錯配修復(fù)蛋白2抗體 BEL-7402細(xì)胞，肝癌細(xì)胞 人口腔表皮樣癌細(xì)胞,KB細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2

EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 CaN  大鼠鈣調(diào)0酸酶 96T

5 MethylCytosine： 5甲基胞抗體 人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHA-sp NA

NIH/3T3小鼠胚胎細(xì)胞 NIH/3T3 mouse embryo cells DMEM+10%NBCS(小牛血清) 大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒 IFN- Alpha(Human Interferon Alpha)  人α干擾素 96T

NCI-H23人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞CXCL16 Protein Canine 重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA 試劑盒 H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原 0.5mg

HIP1： 亨廷頓(舞蹈癥)相互作用蛋白1抗體 PDK4 Others Mouse 小鼠 PDK4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人外周血白細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人的幽門螺桿菌IgG(HP IgG)ELISA試劑盒 H2AX peptide 組蛋白H2AX多肽抗原 0.5mg

HAO1： 葡萄糖氧化酶1抗體 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-6 羊膜細(xì)胞，WISH細(xì)胞 786-O [786-0](腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞)

CD83 Others Rat 大鼠 CD83 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人的神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA 試劑盒 H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原 0.5mg

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。